no local da colheita realizaram-se trico- tomia e antissepsia cirúrgica. O sangue fresco total (sangue colhido
no máximo seis horas antes) foi centri- fugado e separado em concentrado de hemácias e plasma fresco congelado, quando possível. O armazenamento do sangue total e
do concentrado de hemácias foi feito em geladeira comum, a temperatura de 4ºC e validade máxima de 28 dias. O plasma fresco congelado foi armazenado em um freezer comum a -18 ºC, por um ano. O volume do hemocomponente a ser transfundido foi calculado empregando as fórmulas indicadas na figura 1. O método utilizado para verificar a compatibilidade sanguínea entre doador e receptor foi a reação cruzada, também chamada de teste de compatibilidade, realizada em todos os animais que ha- viam passado por transfusão anterior. Para a realização dessa reação, cole-
taram-se amostras de sangue em tubo de EDTA do receptor, separando-se amos- tras de sangue da bolsa de transfusão dos possíveis doadores. As amostras
Volume (mL) sangue total = 90 x peso do paciente (kg) x [(VG% pretendido - VG% paciente) / VG do doador] Volume (mL) concentrado de hemácias = peso do paciente x (VG% pretendido - VG% paciente) x 1,1 Volume (mL) plasma = 10 a 15mL/kg
Figura 1 - Fórmulas utilizadas para calcular o volume a ser transfundido de sangue total, concen- trado de hemácias e plasma fresco congelado
Tubo 1 - Prova maior = plasma do receptor + hemácias do doador Tubo 2 - Prova menor = plasma do doador + hemácias do receptor Tubo 3 - Controle do receptor = plasma do receptor + hemácias do receptor Tubo 4 - Controle do doador = plasma do doador + hemácias do doador
Figura 2 - Provas realizadas na reação cruzada
foram centrifugadas (1000 x g por cinco minutos), e o plasma de cada uma foi re- movido com pipeta e transferido para um tubo identificado. As hemácias fo- ram lavadas com solução fisiológica três vezes e em seguida ressuspendidas em solução de 0,98mL de solução fisiológica para 20Lde hemácias. Foram preparados para cada doador quatro tubos identificados e adicio- naram-se em cada tubo 4 gotas (100L) de plasma e 2 gotas (50L) da suspen- são de hemácias (Figura 2).
Cada tubo foi homogeneizado e incu-
bado a 37 ºC por quinze minutos, e em seguida centrifugado. Foi verificada a presença de hemólise no sobrenadante e o botão de hemácias foi ressuspendido para verificação de aglutinação macros- cópica. Além disso, realizou-se a análise microscópica da amostra. O resultado positivo foi dado pela presença de he- mólise e/ou aglutinação e o negativo pela ausência de hemólise e aglutina- ção, o que indica compatibilidade san- guínea.
Clínica Veterinária, Ano XV, n. 86, maio/junho, 2010
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