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ñirán con los líquidos básicos (color rosa) de coloración. La presencia de un preci- Si el colorante es muy ácido, los eri-
y las básicas (acidófi las), con los líquidos pitado sobre la extensión se puede deber trocitos se verán de color rojo brillante
ácidos (color azul). al uso de portaobjetos sucios, al secado y los núcleos de los leucocitos de color
Para las tinciones de sangre se utilizan durante el periodo de tinción, al lavado azul pálido o, a veces, incoloros. Si la
varios tipos de colorantes: Romanowsky, inadecuado del porta al fi nal de dicho pe- coloración se ve muy rosada es debido
Wright, Giemsa y Diff-Quik. riodo -en especial si éste se mantiene en a una tinción insufi ciente o a un tiempo
La que nosotros utilizamos con mayor horizontal-, a la fi ltración inadecuada del de lavado prolongado. Si el colorante es
frecuencia es la coloración de Diff-Quik colorante o al depósito de polvo sobre el demasiado básico, los eritrocitos se verán
por su rapidez y facilidad en la prepara- porta o la extensión. de color azul pizarra.
ción, mantenimiento y conservación. Esta En una extensión bien realizada se Las extensiones ya teñidas se tienen que
técnica tiñe de manera excelente los or- deben diferenciar correctamente los eri- secar al aire poniendo el porta inclinado,
gánulos el citoplasma de las células y el trocitos con su color anaranjado claro u casi en posición vertical para que el agua
núcleo y los nucléolos. oscuro, según su nivel de hemoglobina. sobrante del lavado escurra por efecto de
Se deben ver bien las granulaciones de la gravedad. Nunca se debe agitar el porta
Características de una buena tinción los neutrófi los, de los eosinófi los (con con sacudidas violentas, ya que el agua que
Una muestra bien teñida no debe tener su color rosa nítido) y los linfocitos (de queda puede modifi car el punto exacto de
Figura 5. A. Extensión bien hecha. B. Tamaño precipitaciones del colorante ni artefactos azul oscuro). tinción y la nitidez de la preparación. †
de la gota adecuado. C. Evitar gotas de sangre
con burbujas.
El espesor de la extensión depende del
ángulo entre los portaobjetos, del tamaño
de la gota y de la rapidez con que se rea-
liza. Si el espesor es muy grueso, las célu-
las aparecen amontonadas y se identifi can
con difi cultad.
Una buena preparación para contar leu-
cocitos es aquella en la que los glóbulos
rojos aparecen algo amontonados y con
los leucocitos unos cerca de otros pero no
superpuestos entre sí.
Es fundamental tener en cuenta que hay
que utilizar portas perfectamente limpios y
desengrasados.
Antes de fi jar en alcohol metílico
el porta, debemos comprobar que
la extensión esté completamente
seca, para así evitar que se
rompa la película de tinción tras
el paso del primer colorante y al
lavar el exceso de éste.
Defectos más frecuentes en la
preparación de una extensión
En ocasiones, por una mala técnica se
obtienen extensiones de mala calidad. Por
ejemplo:
En las que se ha puesto una gota muy
gruesa se suele llegar al fi nal del portaob-
jetos, por lo cual la gota de sangre no se
extiende bien y no se forma la zona de
fl ecos.
Si el porta se levanta antes de acabar
de hacer la extensión, aparecen zonas no
homogéneas en la capa de células.
La presencia de estrías en la gota de
sangre difi culta la lectura de las células.
Fijación
Una vez secas las extensiones el paso si-
guiente será su fi jación, que se realiza con
alcohol metílico. Así se facilita la conser-
vación y la fi jación de las células, que se
adhieren al porta, para que no se despren-
dan en el momento de la tinción.
Antes de fi jar en alcohol metílico el por-
ta, debemos comprobar que la extensión
esté completamente seca, para así evitar
que se rompa la película de tinción tras el
paso del primer colorante y al lavar el ex-
ceso de éste. Ello originaría una extensión
inadecuada con zonas sin teñir y con los
hematíes perforados, que son el resultado
de la humedad que difi culta el contacto
entre las células y el colorante.
Tinciones
En los estudios hematológicos se usan
mucho los colorantes formados por mez-
clas de líquidos ácidos y básicos, por lo
que las tinciones son polícromas: las par-
tes ácidas (basófi las) de las células se te-
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