72
2 抗衰老 主要目标是全面了解护肤活性成分对蛋
白酶体活性的影响，涵盖整个老化年龄段， 包括对于影响皮肤健康的普通环境应激因素 的响应。通过在标准生理条件和UVB介导衰 老条件下评价蛋白酶体活性（比较15岁供体 和62岁供体），考察了细胞衰老的各种贡献 因子。
泛素 泛素
小时之后，测量蛋白酶体活性，一式三份。 共测试了四批样品。 ■ 第1批：阴性对照物。 ■ 第2批：用0.1%护肤活性成分处理，包含 100%完整活跃植物细胞，护肤活性成分为粉 末形式。 ■ 第3批：用0.2%护肤活性成分处理，包含 100%完整活跃植物细胞，护肤活性成分为粉 末形式。 ■ 第4批：用0.5%护肤活性成分处理，包含 100%完整活跃植物细胞，护肤活性成分为粉 末形式。 评价蛋白酶体活性时采用合成肽，其N
待降解的蛋白质
在使角质形成细胞接触护肤活性成分24 待降解的蛋白质
图1：蛋白质分解
细胞，这为化妆品领域的创新工作奠定了基 础，因为这些细胞可以给皮肤提供宝贵的 生物活性，在植物美容与科学之间实现完美 互动。
端封闭，C端与荧光自由基连接。用底物培 养细胞后测量荧光，计算总活性与有蛋白酶 体抑制剂时的剩余活性之差，从而确定蛋白 酶体的活性。
8 生物技术方法的重要性
在自然衰老条件下（62岁供体） ■ 当浓度为0.1%时，20S蛋白酶体的活性增 加了24%，26S蛋白酶体的活性增加了12%， PA28蛋白酶体的活性增加了20%。 ■ 当浓度提高到0.2%时，20S蛋白酶体的活 性大幅增加了52%，26S蛋白酶体增加了23%， PA28蛋白酶体增加了27%。 ■ 当浓度为0.5%时，观察到蛋白酶体活性 有最大幅度的增加，其中20S蛋白酶体增加 了65%，26S蛋白酶体增加了27%，PA28蛋白 酶体大幅增加了59%。
在光致衰老条件下（UVB 100mJ/cm2
350 300 250 200 150 100 50 0
350 300 250 200 150 100 50 0
，15岁
供体） ■ 当浓度为0.1%时，20S蛋白酶体的活性增 加了44%，26S蛋白酶体增加了24%，PA28蛋 白酶体增加了17%。 ■ 当浓度为0.2%时，20S蛋白酶体的活性增 加了70%，26S蛋白酶体增加了38%，PA28蛋 白酶体增加了32%。 ■ 当浓度为0.5%时，观察到蛋白酶体活性 有最大幅度的增加，其中20S蛋白酶体增加 了78%，26S蛋白酶体增加了49%，PA28蛋白 酶体增加了45%。 下图直观地显示了这些结果，反映了自
+12%+12% +24%+24% 对照组 对照组 (0.1%) + 底物
然衰老条件和光致衰老条件下蛋白酶体活性 随浓度增加的情况：
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(0.1%) + 底物
与从植物各个部位采集成分的传统提取 方法不同，这种创新方式依赖于完好无损的
这些活跃细胞完全由植物本身天然产生 的化合物和元素构成。严格的功效和安全性 测试一再证明了这些分子与皮肤完全相容。 所以，借助木槿细胞与芸香苷分子的协同增 效组合，可以实现提高细胞内所有活性分子 生物利用度的终极目标，最终为皮肤带来更 大益处。
为了进一步加强丰富度，我们把从日本 虎杖提取的天然生物类黄酮——芸香苷分子 通过精心设计的封装方法加入到植物细胞 内。8这种独特组合可以利用芸香苷分子的 优点，放大木槿完整活跃细胞的功效。
泛素化蛋白质 泛素化蛋白质 ATP ATP ATP 图3：细胞呼吸过程
必须强调的是，这种产品完全基于植 物，体现了Naolys对于天然可持续护肤理念 的承诺。在环保意识日益高涨的今天，美容 行业的生态影响正受到越来越多的审视。作 为这方面的变革力量，植物细胞生物技术已 崭露头角。通过挖掘活跃植物细胞的潜力， 可以显著降低对资源密集型农业的需求，缩 小碳足迹，减少废物。
CO2 H2 O
蓝鸟木槿细胞与芸香苷分子的独特组合 可作为护肤活性成分，解决蛋白酶体活性下降 和细胞呼吸减少的问题。为了纠正与年龄相关 的细胞代谢减缓现象，必须把这些作为重点。
活跃植物细胞。从一份植物样品就可以得到 蛋白酶体研究 大量的这种细胞。
伴随年龄增长，由于自由基的影响，细 胞中的蛋白质会逐渐失去稳定性和功能。蛋
2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0
图4：缺氧条件下的CO2释放结果
白酶体是负责使氧化、改性、废弃蛋白质分 + 缺氧 解的蛋白质复合物，它的活性随年龄而减
对照组 缺氧
弱。研究证明，本护肤活性成分可以提高这 种活性，从而把细胞代谢保持在最佳水平。 作为关键的细胞结构，蛋白酶体对于细
+20%+20%
这项工作有几个重要发现。 ■ 相对于衰老细胞（62岁供体）和接受UVB 照射的细胞，蛋白酶体亚单位在标准生理条 件（15岁供体）下的活性更高。 ■ 使用护肤活性成分后，两种衰老条件 （62岁供体自然细胞衰老和UVB介导衰老） 下的蛋白酶体亚单位活性都得到恢复。 ■ 在标准生理条件（15岁供体）下未观察到 显著效果，说明衰老主要受培养条件影响。 研究表明护肤活性成分能够提高蛋白酶
20S ■ 26S ■ PA28 ■ +59% +27%+27% +59% 20S ■ 26S ■ PA28 ■ 图2：自然衰老条件（62岁供体）下蛋白酶体活性（nmoles/min/mg）的体外试验结果
体的活性，从而对抗细胞衰老作用，尤其 是在老化皮肤细胞和UVB介导衰老皮肤细胞 中。蛋白酶体活性的增加幅度与活性成分 浓度相关，反映了护肤活性成分对于关键 细胞机制的积极影响。这些发现说明，该 活性成分可以调节细胞衰老，增进皮肤总体 健康，为支持其功效提供了更多有价值的 证据。
+23%+23% +52% +52% (0.2%) + 底物 (0.2%) + 底物 +27%+27% +65% +65% (0.5%) + 底物 (0.5%) + 底物 C1 乳酸酯
精密的蛋白质循环系统，发挥维持蛋白质稳 定，控制质量，保证细胞生长，管理应激响 应等重要功能。
芸香苷 (C1=0.001%, C2=0.002%, C3=0.005% ■ PE (HSB+R) (B1=0.1%, B2=0.2%, B3=0.5% ■ 体。主要有两种蛋白酶体：26S蛋白酶体一
蛋白酶体的形态是一个大型多催化蛋白 质复合物，类似于桶状。这个复合物包含各 种蛋白质亚单位，它们共同形成中空的圆柱
般存在于真核细胞中，20S蛋白酶体普遍存 +57%
在于原核生物中。9 +43%
9 +18% +52%
标记为需要降解的蛋白质。这些目标蛋白质 以泛素进行标记，泛素是一种小蛋白，与待 废弃的蛋白质连接。在蛋白酶体中，这些已 标记的蛋白质被细致地分解成较小的肽。10 这种关键的细胞结构起到核心作用，负 责管理细胞内蛋白质的数量和质量。它发挥 重要功能，清除受损或过多的蛋白质，从而 维持细胞内稳态。11
蛋白酶体的工作方式是选择性地分解被 +23%
+31% 10 B1 C2 B2
+ 缺氧 11
C3 B3 + 缺氧
蛋白酶体参与许多生物过程，包括调控 细胞周期，管理应激响应，控制免疫相关蛋 白，炎症响应等等。12
12 胞中蛋白质的降解起核心作用。它就像一个 细胞呼吸研究
除了蛋白酶体活性，研究还证明细胞呼 吸随年龄增长而减弱，导致细胞产生的能量 减少。这项工作以细胞能量为焦点，考察护 肤活性成分对于细胞呼吸和代谢途径的影响。 细胞呼吸是一种基本过程，由细胞从营 养物中提取出能量供其活动。它涉及细胞内 发生的一系列代谢反应，主要是在线粒体 中。起点是细胞质中的糖酵解反应，将葡 萄糖分解成丙酮酸，并产生少量三磷酸腺苷 （ATP）。
13
下一阶段取决于氧的供应情况。在有氧 条件下，丙酮酸进入线粒体，经过克氏循 环，通过电子传递链中的氧化磷酸化作用产 生更多的ATP。这被称为有氧呼吸，能以很 高的效率产生大量ATP。
在无氧条件下，细胞进行无氧呼吸。丙 酮酸被转化为乳酸酯或进行发酵，在无需氧
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由于它在各种细胞过程中的重大作用， 蛋白酶体代表了医疗领域的一项重要治疗目 标。伴随对这种细胞复合物的研究，我们可 以更深入地了解其细胞生物学和对于各种疾 病的意义。13
本质上，蛋白酶体是一种必需的细胞结 构，随时都在选择性地分解蛋白质。它对保 持细胞平衡，调节多种生物过程有不可磨灭 的贡献。
这项体外研究旨在评价护肤活性成分在 人重建角质形成细胞中对蛋白酶体活性的影 响，采用特殊的培养条件来模拟皮肤老化过 程的不同阶段。
研究工作采用标准生理条件，包括生理 性细胞衰老和由UVB照射介导的衰老。所用 的细胞来自15岁和62岁供体，后者代表衰老 细胞，而15岁供体细胞接受UVB照射，作为 UVB介导衰老模型。
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待循环的蛋白酶体和 泛素
待循环的蛋白酶体和 泛素
葡萄糖
抗衰老
3
线粒体 ATP 蛋白质进入蛋白酶体 蛋白质进入蛋白酶体 有氧 NADH TCA循环
乙酰辅 酶A
丙酮酸 无氧 蛋白质片段 (肽)蛋白质片段 (肽) NADH 发酵 NAD+ 糖酵解
NAD+ NADH
补充
蛋白酶体活性（nmoles/min/mg）
蛋白酶体活性（nmoles/min/mg）
释放的14
CO2
(cpm)
电子传递
NADH FADH2
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