Scriptie
05
Y Hypothese Het verbeterde wondherstel en de verminderde litteken- vorming bij CLP-patiënten door honing wordt mogelijk ge- medieerd door het bevorderen van ontstekingsremmende paden. We stelden dat de ontstekingsremmende effecten van honing gemedieerd worden door het bevorderen van een scheefgroei naar HO-1- en CD163-positieve ontste- kingsremmende M2-macrofagen. Daarnaast stelden we dat honing de iNOS-positieve pro-inflammatoire M1 zou tegengaan.
Y Methode Om deze hypothese te testen, werden verschillende con- centraties Mesitran- en Manuka-honing evenals positieve controles toegevoegd aan muismacrofagen (RAW 264.7). Vervolgens werd een CCK-8 analyse (N=5) en qPCR (N=2) assay uitgevoerd om informatie te krijgen over de levens- vatbaarheid van de cellen en de genexpressie van de verschillende specifieke markers. LPS werd gebruikt om de cellen naar het M1-fenotype te sturen, terwijl IL-4 werd toegevoegd om het M2-fenotype te sturen. Om te bepalen of een M1 cel is ontstaan, is de marker NO gebruikt. De marker CD163 verwijst naar het M2-celtype. Een morfo- logieanalyse werd uitgevoerd om de celvorm onder de microscoop te beoordelen. Voor de statische analyse om de levensvatbaarheid te bepalen is gebruikgemaakt van de Shapiro-Wilk-test en de ANOVA. Voor het PCR-experiment heeft geen statische analyse plaats gevonden.
Y Resultaten De CCK-8-analyse toonde geen significante verschillen in cellulaire levensvatbaarheid tussen de controle met alleen medium en de cellen waar honing aan toegevoegd is. De morfologieanalyse onthulde geen dominante celvorm na behandeling met honing of positieve controles, wat aangeeft dat beide morfologieën aanwezig waren. Het RNA kon succesvol worden geïsoleerd van de behandelde macrofagen en er werd genexpressie waargenomen voor zowel iNOS als HO-1 in de honingbehandelde cellen.
Y Conclusie en aanbeveling Honing heeft geen negatieve invloed op de levensvatbaar- heid van macrofagen en bevordert de expressie van zowel pro-inflammatoire als anti-inflammatoire genen in ver- gelijking met de algemene controle. De genexpressie lijkt meer op die van LPS, hoewel met minder expressie, dan op die van IL-4. Er kon echter geen definitieve conclusie worden getrokken over de vorming van M2-macrofaagty- pen, aangezien gegevens over de CD163-marker ontbra- ken. Wel kan geconcludeerd worden dat honing invloed heeft op de wondgenezing bij CLP-patiënten. De resultaten laten zien dat honing het type macrofaag be- invloedt om wondgenezing te verbeteren. Honing verhoogt de levensvatbaarheid van macrofagen en stimuleert de expressie van zowel pro-inflammatoire als anti-inflamma- toire genen, wat kan bijdragen aan een verbeterd wond- herstel. Aanvullende studies met grotere steekproeven en de validatie van extra markers, zoals CD206, worden aanbevolen om deze bevindingen verder te onderbouwen.
Y Discussie Het onderzoek stuitte op enkele uitdagingen, zoals het ge- infecteerd raken van de cellen. Daarnaast konden we niet alle concentraties honing testen, vanwege een tekort aan materialen. Ook zijn er voor de morfologie-analyse ver- schillende vergrotingen gebruikt, wat de interpretatie kan beïnvloeden. Het RNA-isolatieproces werd echter goed uitgevoerd. Verder werden er uitdagingen ondervonden bij de qPCR-analyse en de evaluatie van de genexpressie van macrofagen. Z
VIJF OP EEN RIJ
De vijf genomi- neerde scripties strijden ook dit jaar niet alleen om de jury- prijzen, maar ook om de felbegeer- de publieksprijs. Om jouw voor- keur te bepalen zijn er samen- vattingen van de scripties, maar ook video’s die de studenten achter de scrip- ties hebben gemaakt. Wie weet jouw stem binnen te slepen? Scan de QR-code, bekijk de video’s en stem!
SEPTEMBER 2023 NT DENTZ 53
Page 1 |
Page 2 |
Page 3 |
Page 4 |
Page 5 |
Page 6 |
Page 7 |
Page 8 |
Page 9 |
Page 10 |
Page 11 |
Page 12 |
Page 13 |
Page 14 |
Page 15 |
Page 16 |
Page 17 |
Page 18 |
Page 19 |
Page 20 |
Page 21 |
Page 22 |
Page 23 |
Page 24 |
Page 25 |
Page 26 |
Page 27 |
Page 28 |
Page 29 |
Page 30 |
Page 31 |
Page 32 |
Page 33 |
Page 34 |
Page 35 |
Page 36 |
Page 37 |
Page 38 |
Page 39 |
Page 40 |
Page 41 |
Page 42 |
Page 43 |
Page 44 |
Page 45 |
Page 46 |
Page 47 |
Page 48 |
Page 49 |
Page 50 |
Page 51 |
Page 52 |
Page 53 |
Page 54 |
Page 55 |
Page 56 |
Page 57 |
Page 58 |
Page 59 |
Page 60 |
Page 61 |
Page 62 |
Page 63 |
Page 64
