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Diversité génétique des abeilles L’hybridation, en 3 Tps !
Un sujet qui vous permet d’aborder les thèmes : • « de la diversification des êtres vivants à l’évolution de la biodiversité » • « enjeux planétaires et contemporains »
Manipulations : • PCR
• Électrophorèse
• Observation à la loupe binoculaire • Analyse d’images
Après la domestication des plantes, introduisez la domestication des animaux : hybridation des abeilles pour obtenir des lignées adaptées aux besoins de l’homme ; conséquence sur les écosystèmes et sur l’avenir des abeilles sauvages.
Apis mellifera carnica
Apis mellifera mellifera
PCR et électrophorèse des résultats : amplifier pour identifier Objectifs cognitifs :
Ce kit propose de réaliser l’amplification de brins d’ADN synthétiques de différentes tailles, pour simuler les brins d’ADN de deux espèces d’abeilles. Les élèves pourront réaliser une PCR soit à l’aide de trois bains-marie (méthode historique de la PCR), soit à l’aide d’un thermocycleur (méthode actuelle). Les protocoles de réalisation de ces deux méthodes de PCR sont fournis dans la notice pédagogique. Afin d’observer leurs résultats de PCR comme le font les chercheurs en laboratoire, les élèves effectuent ensuite une électrophorèse d’ADN des quatre échantillons (marqueur de poids moléculaire de l’ADN, amorces de PCR, produit de PCR).
Composition :
• 10 µl de TAQ Polymerase • 100 µl de tampon de réaction B 10 x • 100 µl de MgCl2 • 25 µl de dNTP mix • 5 µl Amorce 1 • 5 µl Amorce 2
• 5 µl d’ADN à identifier 1 • 5 µl d’ADN à identifier 2 • 200 µl de bleu de dépôt • 150 µl d’ADN Témoin Q • 150 µl d’ADN Témoin PQ • 150 µl de marqueur • 2 g d’agarose
218
• 100 ml TAE 10 x • 0,16 g d’Azur A • 12 microtubes à PCR
Matériel nécessaire : • 3 bains-marie ou un thermocycleur
• Cuves à électrophorèse d’ADN
• Alimentation pour cuves à électrophorèse d’ADN • Micropipettes et cônes • Éthanol absolu • Gants